革兰染色正确顺序:1、涂片固定;2、草酸铵结晶紫染1分钟;3、蒸馏水冲洗;4、加碘液覆盖涂面,染约1分钟;5、水洗,用吸水纸吸去水分;6、加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分;7、蕃红染色液(稀)染1分钟后,蒸馏水冲洗;8、干燥,镜检。
革兰染色步骤正确顺序
革兰氏染色是用来鉴别细菌的一种方法:这种染色法利用细菌细胞壁上的生物化学性质不同,可将细菌分成两类,即革兰氏阳性与革兰氏阴性。这一染色方法由丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰于1884年所发明,最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系。
原理:通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色。
而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。
时间: 2024-11-03 22:02:15